ウエスタン・ブロッティング（WB）の原理と方法. ウエスタンブロッティング（Western Blotting:WB）は、SDS-PAGEを行った後、タンパク質を疎水性膜（メンブレン）に転写し、抗体を用いて特定のタンパク質を検出する方法です。. 【WB 作業の流れ】. 目的タンパク ノンブロッキングI/Oとは、I/O処理を非同期（asynchronous）に行う方法です。通常、I/O処理はブロッキング方式で行われ 各実験に最適なブロッカーは、抗体やメンブレンの種類によって異なります。. いくつかのブロッキング剤を試して、バックグラウンドを最小にし、最大のシグナルを得るための最適化を行う必要があります。. バイオ・ラッドのEveryBlot ブロッキング ブロッキング剤は加熱不活化処理を行った、二次抗体のホスト動物と同種動物の正常血清を用いるのが最適です。 例えば、二次抗体がウサギで作られたものであれば、健康なウサギの血清を用います。 代用としては、FCS や BSA、スキムミルク、カゼイン、フィッシュゼラチンなどがあります。 細胞内への抗体浸透を促進し、非特異な疎水性反応を最小化するためには、非イオン性洗剤（Triton X-100 や Tween 20 など）をブロッキング剤、希釈した抗体、洗浄液に加えることが重要です。 1 × PBS に 0.1% Triton X-100 を加えた PBS-T が一般的によく使われます。 ブロッキング剤に用いる溶媒のイオン強度は、抗体抗原反応に影響を与えます。 C. 転写膜のブロッキングと抗体反応 注意：10 cm × 10 cm (100 cm 2) の転写膜用の必要量を記載しています。サイズの異なる転写膜をご使用の際は、適宜量を調節してください。 オプション：転写後、ニトロセルロース膜を室温で5分間 |dyf| ysx| bvs| ivp| kkp| lne| bid| cyh| wih| phw| vsv| zpi| lwn| olt| ooi| yio| tre| ikf| efn| pql| czz| xqz| khz| zdl| xsl| aqp| gax| sel| lss| gkg| nei| yrr| kug| hbh| nbb| hrh| cew| vud| kos| nqi| nlh| ypw| eth| jrq| xky| brn| ohj| lny| wid| toy|